癌症等疾病的流行以及对免疫疗法需求的增加正在推动针对致病细胞和生物体的技术的发展。这导致了所谓的抗体库的发展。从历史上看,开发预防疾病的疫苗和治疗方法的主要方法是从感染后幸存下来的人身上收集抗体。免疫细胞需要分离,并且必须筛选大量抗体,以找到与特定病原体结合最紧密的抗体。然而,这可能很耗时,有时时间至关重要——COVID-19大流行一直提醒着我们。
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顾名思义,抗体库是现有抗体的文库,可以搜索这些库以提供可能对病原体有效的抗体。通过采用这种方法,可以大大加快药物发现过程。通过从几百人那里收集样本,抗体库中可以存储许多倍的人类抗体。
抗体库是衍生抗体的重要资源,可用于广泛的应用,从结构和功能研究到细胞内蛋白质干扰研究,再到开发新的诊断和治疗方法。无论目标是什么,抗体库的关键参数是其复杂性(也称为多样性),即集合中不同元素的数量,这直接反映了在库中发现针对给定抗原的抗体的概率,具有足够高的亲和力。由于抗体库序列的高度相似性和长度,长期以来,抗体库复杂性和质量的定量评估一直没有得到充分解决。复杂性通常由转化效率推断,并通过指纹识别和/或对几百个随机文库元素的测序进行测试。
抗体库中常用的一种技术是噬菌体展示,其中表面带有抗体的基因操纵噬菌体与固定化抗原结合。洗涤后,任何剩余的噬菌体都会显示感兴趣的抗体。然后可以将这些插入大肠杆菌中以扩增抗体以进行进一步研究。
目前世界上有很多的全人源抗体库,可以分为天然抗体库,半合成抗体库和合成抗体库,不过大部分抗体文库都存在着供体少、库容低、多样性差、亲和力弱、错配率高等问题,普健生物构建了千亿级别、高亲和力全人源重组天然抗体文库,经过验证,任意靶点从文库中直接筛选,一般可以获得十几个到上百个高亲和力的克隆,其亲和力、特异性都达到行业领先水平。
普健生物拥有领先的噬菌体技术平台,利用噬菌体展示技术,普健生物提供构建噬菌体展示抗体文库、噬菌体展示多肽文库、抗原表位筛选、抗体亲和力成熟等技术服务。同时普健生物具有鼠源天然抗体文库、兔源天然抗体文库、纳米抗体天然抗体文库、重组全人源噬菌体抗体文库等。
普健生物千亿级全人重组抗体库优势:
1.序列正确性高,现阶段库容已达近千亿级别(1011pfu)。
2.两步法建库,先连入轻链再连入重链,将来自全世界不同地区人种来源的轻链和重链随机组合,保证了库的高质量和多样性。
3.分为κ和λ两种轻链亚型的单链抗体库,与大多数商业化混合库不同,即可用于筛选κ型抗体,也可用于筛选λ型的高亲和力抗体。
4.带有His标签,可直接用phagemid表达抗体,His标签纯化。
QC检测:
1.总插入率及正确率
片段插入率100%,抗体序列正确率>90%。
2.抗体序列多样性分析
种系基因(Germline)分析:种系基因主要指单倍体生殖细胞和干细胞中所含有,未发生重排的全部基因。抗体库一般只分析抗体序列里面V基因的种系分布。
互补决定区(CDR)分析:抗体分子可分为恒定区和可变区两部分。在可变区内有一小部分氨基酸残基变化特别强烈,
这个区域称高变区(HVR)。在L链、H链的V区中有三个高变区,该部位因在空间结构上可与抗原决定簇形成精密的互补,又称互补性决定区。
我们的优势
丰富的噬菌体抗体技术经验,五年以上噬菌体抗体开发,交付上百个噬菌体展示抗体开发项目
具有全人源重组抗体库,库容高达千亿级别(1011pfu),两步建库法,保证了文库的多样性,抗体库片段插入;正确率高;可以两周拿到全人源重组抗体
可以构建多物种(人源、小鼠、兔子、羊驼等)抗体文库
可以构建多种类型(scfv、Fab、VHH等)的抗体文库
研究人员越来越多地使用抗体库来寻找新的药物靶点、抗体、疾病的生物标志物等。随着更多抗体的发现和更多的组合被纳入其中,新药和疫苗的开发将继续显示出改进。